Obtención de factores de crecimiento a partir de medios condicionales: aplicación en cultivos celulares / Otention of growth factors from conditional medium': apllication in cell cultures

Entre las diferentes actividades biológicas de la interleucina-6 se encuentra la inducción de la proliferación de cultivos de hibridomas/plasmacitomas y la estimulación de los progenitores hematopoyéticos pluripotenciales, que alcanza su desarrollo y diferenciación en presencia de otros factores de crecimiento hematopoyéticos. La interleucina-6 y los factores estimuladores de colonias(fracciones dializadas) se obtuvieron a partir de medios condicionados de fibroblastos y de placenta humana, respectivamente. Mediante la proliferación de la líneacelular de mieloma de ratón P-3X63-AG853 se comprobó la acción estimuladora de los medios condicionados de fibroblastos, en especial cuando éstos se trataron con concanavalina A y se obsrvaron agrupaciones celulares(clusters) y colonias en los cultivos de médula ósea humana suplementados con las fracciones de medios condicionados de placenta

Obtanción de plasma con concentraciones altas de eritropoyetina a partir de ratones irradiados y tratados con fenilhidracina / Ottainment of plasma with high concentrates of erythropoietin from mice irradiated and treatted with phenylhydrazine

Se obtuvo plasma múrido con concentraciones altas de eritropoyetina (Epo) mediante la combinación del efecto aplasiante de la irradiación con el efecto hemolítico de la fenilhidracina (FH). Los ratones se irradiaron (5,5-6,0 Gy) con una fuente de Co-60, a las 24 h se les inyectó FH por via intraperitoneal (60 mg/Kg), y se sacrificaron al noveno dia. Se hizo una mezcla de plasma con las muestras que tenían un hematócrito menor o igual a 0,10. La concentración de Epo determinada por el método de bioensayo con Fe-59 teníendo como patrón el estándar internacional, fue de 28 UI/mL. Este plasma se puede utilizar como fuente del factor estimulador para el crecimiento de colonias eritroides en los cultivos de médula ósea, donde se utiliza como promedio 1-2 UI de Epo por placa cultivo

Aplicación de los cultivos de la médula ósea humana a largo plazo en el estudio del estroma medular y la hematopoyesis / Application of long-term human bone marrow cultures to the study of marrow stroma and hematopoiesis

Se señalan los aspectos más importantes en el desarrollo de las técnicas de cultivo de la médula ósea a largo plazo, para el estudio morfológico y funcional de las células que conforman el estroma medular in vitro. También se mencionan algunas experiencias del desarrollo de estos procedimientos en nuestro laboratorio. Se analiza el papel de las células del estroma en el mantenimiento de las células hematopoyéticas en el cultivo a largo plazo. Se describen las células que constituyen el estroma medular in vitro, la importancia de la matriz celular y algunos aspectos de la interacción celular

Micrométodo para el estudio citogenético de poblaciones celulares in vitro / Micromethod for the cytogenetic study of cell populatios in vitro

Se comprobó la aplicación del micrométodo citogenético para el estudio cromosómico de poblaciones celulares hematopoyéticas, originalmente desarrollado por Amenomori et al. (1985) en cultivos de metilcelulosa y se demostró la ampliación de la aplicación del método en células no hematopoyéticas en suspensión y adherentes a partir de cultivos líquidos. Se obtuvo un número óptimo de metafases analizables en los estudios de: a) células progenitoras hematopoyéticas de médula ósea, en cultivo, de una paciente con leucemia mieloide crónica en crisis blástica, que dió como resultado las alteraciones cromosómicas 47XX,+ 8,t (9,22), i (17 q), comunes en esta fase de la enfermedad; b) células de sangre periférica, en cultivo, de una paciente con trasplante de médula ósea, en el que se comprobó con el gonosoma Y, la implantación de las células del donante a los 21 días de trasplantada; c) 3 líneas celulares K-562, SKO-007 y GL-G, con lo que se logró la caracterización citogenética de todas con la consiguiente determinación del número modal en cada una de ellas y la presencia de cromosomas marcadores

Frecuencia de policitemias absolutas y relativas en un estudio de 300 volemias / Frequency of absolute and relative polycythemias in a study of 300 blood volumes

Se revisaron 300 volemias de casos remitidos al Instituto de Hematología e Inmunología por presentar cifras de hematocrito por encima de lo normal. Las volemias se agruparon de acuerdo con el resultado de volumen plasmático, en 154 policitemias absolutas y 116 relativas. Del total de volemias, 30 fueron normales. Hubo un predominio del sexo masculino que se mantuvo al agrupar a los pacientes según el resultado de la volemia. En cuanto a edad, se observó que la policitemia absoluta, fue más frecuente en la sexta década de la vida, mientras que la relativa lo fue en la tercera. Se apreció que el aumento del volumen globular se acompañaba de un incremento del hematocrito, sobre todo con los valores más altos de este último. Esto también sucedió con la policitemia relativa, pero de manera inversa, donde la mayoría se agrupó en las cifras más bajas de hematocrito. Se concluye que la frecuencia de policitemia absoluta y relativa según el sexo, edad y hematocrito, es similar a lo señalado por otros autores

Cultivo in vitro de células de médula ósea humana en medio semisólido de metilcelulosa / Culture in vitro of human bone marrow cells in methylcellulose semisolid medium

Se cultivaron células de médula ósea humana en metilcelulosa, sobre la base de la técnica de Iscove et al. Se informa que las células se aislaron con un gradiente de densidad Ficoll-Telebrix y se sembraron en placas de 35 mm durante 15 dias. Se señala que como factor estimulador de colonias se utilizaron 0,25 mL de sobrenadantes de células mononucleadas de sangre periférica normal, estimuladas con fitohemaglutinina. Se comprueba la efectividad del método desarrollado en los cultivos de médula de pacientes con diferentes trastornos hematológicos. Se observa la aparición de agregados al quinto día de cultivo. Las colonias identificadas como granulopoyéticas, macrófagas o ambas inclusive se contaron a los 12 días; el número de éstas varió de acuerdo con la enfermedad estudiada

Efecto del tratamiento sobre lo crecimiento de colonias gránulo-monocitarias en la médula ósea de pacientes con policitemia vera / Effect of treatment on the growth of monocyte-granulocytic colonies in bone marrow of patients with polycythemia vera

Se cultivó en agar semisólido la médula ósea de 15 pacientes con policitemia vera (PV) con el propósito de conocer la acción del tratamiento sobre el crecimiento de las colonias gránulo-monocitarias. Tres de los enfermos no habían recibido ningún tipo de tratamiento previo al estudio, 6 habían tenido como única terapéutica flebotomías seriadas y 6 solamente P a la 32. Se observó que en los enfermos sin tratamiento previo, el número de colonias fue similar al control. En los pacientes tratados con flebotomías el número de colonias fue menor que el control, pero sin diferencia significativa. Los cultivos de médula ósea en los casos tratados con P a la 32 mostraron una reducción marcada en el número de colonias que fue significativa con respecto al control (p < 0,005). Ninguno de los enfermos presentaban leucocitosis, ni hiperplasia granulopoyética. Se consideró que la disminución de colonias en los pacientes tratados con flebotomías refleja un tránsito de los progenitores granulopoyéticos de médula ósea hacia la sangre periférica, por el estrés que se produce en la hemopoyesis como consecuencia de las flebotomías. En cuanto a los enfermos tratados con P a la 32, todo parece indicar que el radionúclido inhibe la población de progenitores granulopoyéticos, sin que se produzca una disminución en el compartimiento de las células precursoras